一種更高效的層析方法--MMC
更新時間:2021-12-23 點擊次數(shù):3072
混合模式層析(mixed-mode chromatography,MMC)對功能配基的結(jié)構(gòu)進行優(yōu)化設(shè)計,組合兩種或以上的相互作用模式,加強對目標(biāo)蛋白的親和性和選擇性,從而提高純化效率。與傳統(tǒng)的IEC和HIC相比,新型層析模式MMC具有高載量、高選擇性和高效率等優(yōu)勢。
MMC配基與目標(biāo)蛋白之間存在多種相互作用模式,包括疏水作用、靜電作用以及氫鍵作用等。
MMC介質(zhì)的配基密度較高,且具有非鹽依賴吸附特性,并可通過調(diào)節(jié)pH來實現(xiàn)蛋白的有效洗脫。
蛋白可與MMC介質(zhì)所偶聯(lián)的疏水基團和離子交換基團共同作用:當(dāng)離子強度較低時,靜電相互作用起主導(dǎo)作用;當(dāng)離子強度較高時,則疏水相互作用占據(jù)主導(dǎo)作用;中等離子強度時,疏水和靜電可能共同作用。
蛋白的洗脫通常有兩個途徑:當(dāng)以疏水結(jié)合為主導(dǎo)時可以通過降低洗脫液pH,通過蛋白和配基之間的靜電排斥作用來實現(xiàn)洗脫;當(dāng)靜電結(jié)合為主導(dǎo)時,則可通過增加離子強度從而減弱靜電相互作用,實現(xiàn)蛋白的洗脫。
月旭科技現(xiàn)有兩種復(fù)合型配基,MMC與MIX A,以下是產(chǎn)品的技術(shù)參數(shù):
Solid MMC 復(fù)合型弱陽離子交換介質(zhì)
層析柱:TXK 50/30;
介質(zhì)類型:Solid MMC;
樣品:300M重組蛋白畢赤酵母發(fā)酵液;
平衡緩沖液:0.4M NaCl,20mM PB,pH6.5;
洗脫緩沖液:1.5M NaCl,20mM PB,pH6.5。
層析柱:TXK 50/30;
介質(zhì)類型:Solid MiX A;
樣品:300M重組蛋白畢赤酵母發(fā)酵液;
平衡緩沖液:0.1M NaCl,20mM磷酸緩沖液,pH7.0;
洗脫緩沖液:1.5M NaCl,20mM磷酸緩沖液,pH7.0。