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陰離子交換柱使用特性及維護
更新時間:2017-01-16 點擊次數:3333
陰離子交換柱是以離子交換劑為固定相,依據流動相中的組分離子與交換劑上的平衡離子進行可逆交換時的結合力大小的差別而進行分離的一種層析方法。陰離子交換柱中,基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。
陰離子交換柱的使用特性
1. 常用于分離在水溶液中呈陰離子態的化合物;
2. 陰離子交換柱能與水和有機溶劑兼容,可用甲醇、乙腈和水(包括緩沖鹽溶液)作流動相進行分析;
3. 陰離子化合物的保留能力與流動相的pH、離子強度、流動相中有機相的比例以及溫度有關。通常離子強度越大保留時間越短,流動相中有機相的比例越大保留時間越長;
4. 檸檬酸鹽和磷酸鹽等緩沖鹽通常用于調整流動相的pH和離子強度以改善分離度,但不應超過其pH范圍;
5. 陰離子交換柱的平衡時間相對C18而言較長。
陰離子交換柱的維護
1. 流動相抽濾過0.45um濾膜,樣品針筒過濾;
2. 使用前,先用過渡流動相以1.0ml/min過渡30min,然后用流動相走基線,基線平穩后進樣;使用后,先用純水以1.0ml/min反向沖洗色譜柱40min;然后用40%甲醇反向沖洗40min,保存;過渡流動相,是指有機相和水相比例與流動相相同,只是過渡流動相不含緩沖鹽;
3. 使用保護柱和預柱以延長色譜柱的使用壽命;
4. 再生:反方向接柱,流速0.4ml/min,分別洗脫30ml,依次為1M硝酸銨—40%甲醇溶液—異丙醇—水—洗脫液,然后按規定方向裝柱,用洗脫液洗脫至平衡。