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核殼色譜柱沖洗與操作注意事項
更新時間:2016-08-24 點擊次數:1724
核殼色譜柱沖洗
沖洗核殼色譜柱在分析結束后,用流動相沖洗到基線平穩,然后用10%左右的有機溶劑沖洗色譜柱,主要是沖洗干凈流動相中的緩沖鹽。然后用100有機溶劑沖洗。是梯度變化沖洗。分析物可能為一些能溶解在水中,有些需要用純溶劑才能*去除。如果分析時間緊迫一定要把鹽分沖洗干凈,一般情況不要用純水沖洗色譜柱,特別是反向柱的填料的鍵合集團容易折斷,對核殼色譜柱造成損傷。核殼色譜柱被使用在某種程度上就是開始被污染了,所以色譜柱的壽命和我們使用的情況有很大的關系。雖然被污染但是對分析目標物沒有造成影響我們也就是認為還能用。
核殼色譜柱操作注意事項:
①防止任何固體微粒進入泵體,因為塵?;蚱渌魏坞s質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥,因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相在玻璃容器內蒸餾,而常用的方法是濾過,可采用Millipore濾膜(0.2m或0.45m)等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
②流動相不應含有任何腐蝕性物質,含有緩沖液的流動相不應保留在泵內,尤其是在停泵過夜或更長時間的情況下。如果將含緩沖液的流動相留在泵內,由于蒸發或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,就可能析出鹽的微細晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環和柱塞等。因此,必須泵入純水將泵充分清洗后,再換成適合于核殼色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
③泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完,否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環,zui終產生漏液。
④輸液泵的工作壓力決不要超過規定的zui高壓力,否則會使高壓密封環變形,產生漏液。
⑤流動相應該先脫氣,以免在泵內產生氣泡,影響流量的穩定性,如果有大量氣泡,泵就無法正常工作。