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長假過后,儀器的正確打開方式
更新時間:2022-10-09 點擊次數:1520
小伙伴們好久不見,度過了愉快的假期,是不是意猶未盡,還沒緩過來,說不定我們的儀器也是這樣的狀態呢,長假綜合癥,要開工了先別著急開機,小編有一份開機注意事項送您,看完再開機,保證您今天開工大吉!
| 根據實驗需求配制相應的流動相接入儀器的各個通路,并配制泵頭和自動進樣器的清洗溶液。
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| 若使用ELSD檢測器,首先開啟氮氣壓力到3.5bar,確保能持續供氣(如未配置ELSD檢測器,請忽略此步驟)。 |
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| 設置流動相初始比例開始平衡;若流動相含有緩沖鹽,請先用10%的有機相水溶液進行過渡,再換成儀器方法初始比例的流動相進行平衡。 |
| 執行自動進樣器清洗命令,并將進樣閥切換至Inject的狀態進行平衡。 |
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| 若使用VWD/DAD檢測器,待泵開啟約5min后再打開氘燈和/或鎢燈,并設置檢測波長等。 |
| 若使用FLD檢測器,需設置池溫、激發波長、發射波長、采集頻率等。 |
| 若使用RI檢測器:先打開沖洗閥(purge=on)沖洗參比池約20min,再關閉沖洗閥(purge=off),并設置池溫和極性。 |
| 監測基線,待系統流路充分平衡后,基線正常穩定,可以開始進樣分析。 |
開機后壓力在一段時間逐漸變化(升高或降低),這往往是流動相在色譜柱內還沒有平衡好、柱箱溫度還沒有恒定。這些都不屬于儀器問題,只要多平衡一會就會穩定。若使用的是梯度程序,由于流動相的比例正處在變化中,壓力也會跟隨變化。
泵無壓力,不過液,通常會出現在長假之后,我們排查以下,如果管路里有大段的空氣,重新Purge之后還是不能正常過液,我們可以使用注射器吸出液體重新連接管路,如單向閥問題,可更換單向閥閥芯。
液相色譜儀開機后壓力瞬間變化(>3MPa)。
通常以下四種情況,可依次排查解決:是否有氣泡;是否有漏液;單向閥不良;或者泵工作相位不正確,可逐個排除。
| 準備好樣品,平頭注射器、樣品過濾頭,待進樣時使用。 |
| 餾分收集器內依次放入干凈的試管,試管個數滿足分析時所用個數。 |
| 流動相準備:配置所需的流動相,對配置好的流動相進行超聲、過濾、脫氣,后置于干凈的溶劑瓶,配備的量需足夠分析。 |
| 溶劑濾頭清洗,對新的溶劑濾頭需置于異丙醇中超聲30分鐘,去除雜質,使用過程中,也需定期對溶劑濾頭進行清洗。 |
| 進樣閥清洗,在'LOAD'模式下,以注射器將流動相注入進樣閥內清洗幾次,每次用量可為定量環體積的 2-3倍;后置于'INJECT'模式下,再用流動相清洗進樣閥,每次用量可為定量環體積的 2-3倍。 |
| 按順序打開儀器各模塊的電源→電腦電源→打開工作站。確認各模塊之間的管路連接正常,確認工作站和儀器連接正常。 |
| 紫外可見光檢測器:氘燈和鎢燈使用壽命為2000小時,達到后使用壽命,及時更換氘燈和鎢燈,檢查流通池接頭連接是否緊密。若檢測器內部及外表面濺到液體試劑,及時擦干。 |
| 餾分收集器:將儀器各部分連接好,打開軟件,選擇對應位置,分別發送收集指令,觀察收集管是否在對應的范圍內。 |
| 平衡色譜柱,基線穩定后運行分析系統,手動進樣測試。 |
| 確認供電線、各通訊連接線、管路都已連接,打開各模塊電源,打開電腦上軟件配置,查看軟件與各模塊通訊連接正常。 |
| 檢查各模塊連接接頭是否擰緊,確認色譜柱兩端接頭擰緊。 |
| 檢查凝膠凈化色譜柱是否濕潤,若發現色譜柱內變干,新配環己烷與乙酸乙酯1:1的流動相,設置流速1mL/min,直到色譜柱內填料濕潤復原。 |
| 在色譜系統使用之前,明確以下參數:色譜分析時的所需流動相(為50%環己烷/50%乙酸乙酯);流動相流速;分析時間;檢測波長點;手動進樣量;收集時間、收集條件,并在軟件界面中對應設置所需參數。 |
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| 如果使用儲水罐存放純水的話,查看儲水罐中的純水水位是否夠,潔凈度是否達標。 |
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| 查看進樣小瓶清洗機內腔是否潔凈無異物,如有污物殘留,可先安裝上空籃架,采用快洗模式,預先清洗一遍。 |
反相色譜柱:一般反相色譜柱都保存在80%甲醇水中,在重新使用前,先用80%甲醇水0.3mL/min,30℃柱溫下沖洗4h,在切換到10%甲醇水,沖洗1h,使柱子得到充分活化。
正相色譜柱:在正相模式下使用的正相色譜柱通常保存在正己烷中,活化時,可以先用100%正己烷0.2mL/min,30℃柱溫下沖洗4h,再用做樣流動相1mL/min沖洗2h;在反相模式下使用的正相色譜柱保存在純乙腈中,活化時使用純乙腈1mL/min,30℃柱溫下沖洗2h。
HILIC系列色譜柱:該系列色譜柱通常保存在純乙腈或95%乙腈水中,活化時先用純乙腈0.3mL/min,30℃柱溫下沖洗4h,然后用70%乙腈1mL/min,30℃柱溫下沖洗1h。
硅膠基質離子交換柱:離子交換柱保存在10%甲醇水中,活化時需要在10%甲醇水中0.5mL/min,30℃柱溫下沖洗4h,然后再用過渡流動相1mL/min,30℃柱溫下沖洗1h。
聚合物基質離子交換柱:該系列色譜柱通常保存在純水中,重新活化,H柱可以用pH=2.5硫酸水溶液,Ca柱用0.5g/L EDTA/Ca水溶液0.5mL/min,80℃柱溫下沖洗12h,然后水相環境做樣流速,80℃柱溫下沖洗4h。
SEC分子排阻柱:分子排阻柱保存在10%乙腈水中,重新活化時,第一步用純乙腈,第二步用水,0.5mL/min,30℃柱溫下各沖洗5h。
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| 將切割好的毛細管柱接到進樣口,開通載氣并保持適當流速。 |
| 將色譜柱出口端插入盛有甲醇或乙醇的燒杯,正常情況下應能夠觀察有連續的氣泡冒出,否則應及時檢查是否有漏氣、色譜柱斷裂、或進樣口參數異常。 |
| 用6倍柱體積(或吹掃約15分鐘)的載氣吹掃色譜柱以排除柱內可能存在的空氣。 |
| 設置柱溫箱溫度,起始溫度30℃,保持5分鐘,以5℃/min緩慢升溫至色譜柱溫度上限-20°C后繼續老化2個小時;溫度一般不要超過色譜柱的恒溫溫度上限,柱尾端可以不接檢測器。 |