影響分離的因素與提高
反相高效液相色譜柱柱效的途徑:
(1)液體的黏度比氣體大一百倍,密度為氣體的一千倍左右,故降低傳質阻力是提高柱效主要途徑。
(2)由速率方程,降低固定相粒度可提高柱效。
(3)液相色譜中,不可能通過增加柱溫來改善傳質。
(4)恒溫改變淋洗液組成、極性是改善分離的最直接的因素。
(5)流速大于0。5cm/s時,H~u曲線是一段斜率不大的直線。降低流速,柱效提高不是很大。但在實際操作中,流量仍是一個調整分離度和出峰時間的重要可選擇參數。
(6)氣相色譜中的固定液原則上都可以用于液相色譜,其選用原則與氣相色譜一樣。但在高效液相色譜中,分離柱的制備是一項技術要求非常高的工作,一般很少自行制備。
避免反相高效液相色譜柱過高的柱壓:
雖然色譜柱能耐受的壓力可達6000psi(磅/平方英寸),但過高及過大的壓力變化均會縮短色譜柱的壽命,避免的方法是:
(1)柱壓過高時,盡可能采用較小的流速,以不超過柱最大允許壓力的一半為宜。
(2)當流速較大時,應采取流速梯度的辦法使流速分步到位。
(3)使用手動進樣閥時,進樣閥的切換要盡可能的快。否則超過20%的壓力沖擊會很快使柱報廢。當使用多柱聯用時,柱切換要避免在高壓下進行。