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如何正確使用BC-10脫鹽柱
更新時間:2021-11-19 點擊次數:4078
雖然我們都認為,唯有天才方能造出偉大的作品,但今天我想說,無名的工人同樣能夠制造出毫不遜色的杰作。
利用具有網狀結構的葡聚糖凝膠的分子篩作用,根據被分離物質的分子大小不同來進行分離。層析時,大于凝膠孔徑的大分子,被阻于凝膠相外,沿著凝膠顆粒之間的間隙走,下移速度最快,故最先洗脫下來,中分子物質部分進入凝膠內部,洗脫速度為其次,而小分子物質因全部進入凝膠,受到阻力最大,故最后被洗脫下來,如此物質得到分離。
1.分辨率高,流速適中,易收集,耐酸耐堿耐高溫,具有良好的穩定性;
2.一般生物大分子的分子量比鹽等小分子大許多倍,用凝膠過濾方法為生物產品脫鹽十分簡單、可靠。
用于純化分子量大于5,000 Da的蛋白質分子或替換成所需的緩沖液。
1.平衡:打開上下蓋帽,柱里的保護液自然滴落,繼續加入緩沖溶液,邊滴邊加,至少加3倍柱體積用來清除層析柱中的保護液。
2.進樣:BC-10脫鹽柱的最大進樣體積為2mL,樣品體積不足時,可以在樣品*進入柱床體積后添加緩沖液到總體積2mL。為了增長填料的使用壽命,所用的樣品推薦使用0.45微米的濾膜過濾。
3.洗脫:繼續加入緩沖液進行洗脫。
——該層析柱雖是一次性使用,但是也可以重復再生使用。
1.去離子水洗5個柱體積;
2.0.5M氫氧化鈉清洗2-3柱體積;
3.去離子水清洗3個柱體積;
4.再用20%乙醇洗柱5個柱體積。